滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細(xì)胞的關(guān)系
飼養(yǎng)層細(xì)胞就是指一些特定細(xì)胞經(jīng)有絲分裂阻斷劑處理后所得的細(xì)胞單層。那么滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細(xì)胞的關(guān)系是什么?下面是學(xué)習(xí)啦小編精心為你整理的滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細(xì)胞的關(guān)系，一起來(lái)看看。
滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細(xì)胞的關(guān)系
1.滋養(yǎng)層細(xì)胞:
在胚胎發(fā)育成桑椹胚后，桑椹胚進(jìn)一步發(fā)育，細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)分化。聚集在胚胎的一端，個(gè)體較大的細(xì)胞，稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(inner cell mass，ICM)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，而沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的，個(gè)體較小的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤。
所以做基因診斷時(shí)，通常取少量滋養(yǎng)層細(xì)胞診斷是否患有遺傳病，這樣不會(huì)影響胎兒發(fā)育.
2.飼養(yǎng)層細(xì)胞:
在正常機(jī)體內(nèi)，細(xì)胞除了獲得一些血液來(lái)的營(yíng)養(yǎng)外，還在細(xì)胞與細(xì)胞之間互換特殊的物質(zhì)，用于分裂分化和營(yíng)養(yǎng)等。因而，在細(xì)胞體外培養(yǎng)中，除了正常的培養(yǎng)基外，先培養(yǎng)一層特殊的細(xì)胞，然后再在其上接種要實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞，這樣更能模擬體內(nèi)環(huán)境。這些特殊的細(xì)胞就是飼養(yǎng)層細(xì)胞，通常是成纖維類細(xì)胞、輸軟管表皮細(xì)胞。
這些細(xì)胞可以提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞更好的營(yíng)養(yǎng)，有的分化研究則是必須有飼養(yǎng)層細(xì)胞。
滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細(xì)胞的影響因素
飼養(yǎng)層的影響，主要體現(xiàn)在飼養(yǎng)層種類、絲裂霉素處理滋養(yǎng)層的時(shí)間、飼養(yǎng)層細(xì)胞的代數(shù)和飼養(yǎng)層細(xì)胞的密度等。動(dòng)物種類不同對(duì)飼養(yǎng)層種類的要求也不同。
飼養(yǎng)層種類
STO PMEF： 對(duì)各種動(dòng)物都較適宜，，但最可靠的方法還是根據(jù)動(dòng)物種類篩選最佳飼養(yǎng)層為宜。有研究表明，PMEF比STO更適合用于小鼠ES(胚胎干細(xì)胞)的培養(yǎng)。
UE(子宮上皮細(xì)胞)
BRL(大鼠肝細(xì)胞)等
動(dòng)物種類
需要經(jīng)過(guò)篩選來(lái)確定最適宜該種動(dòng)物ES分離克隆的飼養(yǎng)層
絲裂霉素處理滋養(yǎng)層的時(shí)間
目前絲裂霉素(常用有絲分裂阻斷劑)處理時(shí)間在小鼠成纖維細(xì)胞上一般要求為：在37攝氏度，5%二氧化碳飽和溫度的條件下處理24h，時(shí)間過(guò)短達(dá)不到預(yù)定目的，成纖維細(xì)胞不能被成功地抑制住，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)則使細(xì)胞老化，活性下降，分泌因子的能力降低，從而直接影響ES細(xì)胞增殖和分化的抑制。同時(shí)處理完的清洗工作也很重要，一般要求用無(wú)鈣鎂PBS沖洗4~5遍，以確保絲裂霉素的徹底清除。
飼養(yǎng)層細(xì)胞的代數(shù)及密度
以小鼠成纖維細(xì)胞為例，選3~5代，密度為10^6-10^7個(gè)/ml為宜，代數(shù)過(guò)低所含雜細(xì)胞太多，代數(shù)過(guò)高則細(xì)胞活力降低。
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