沙棗中黃酮類化合物提取工藝條件的研究論文
沙棗中黃酮類化合物提取工藝條件的研究論文
黃酮類化合物(flavonoids)是一類存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)結(jié)構(gòu)的化合物。它們分子中有一個(gè)酮式羰基，第一位上的氧原子具堿性，能與強(qiáng)酸成鹽，其羥基衍生物多具黃色，故又稱黃堿素或黃酮。今天學(xué)習(xí)啦小編要與大家分享：沙棗中黃酮類化合物提取工藝條件的研究相關(guān)論文，具體內(nèi)容如下，歡迎閱讀：
【摘要】 目的 研究用乙醇為溶劑提取沙棗中黃酮類化合物的最佳工藝條件。方法 采用正交試驗(yàn)篩選黃酮類化合物的最佳提取條件。結(jié)果 此條件下提取率為2.295 mg/g。結(jié)論 最佳提取條件為乙醇濃度70%、提取溫度45 ℃、提取時(shí)間30 min、料液比1∶16。
【關(guān)鍵詞】 沙棗;黃酮;提取工藝
【論文正文】
沙棗中黃酮類化合物提取工藝條件的研究
沙棗(Elaeagnusangustifolia L.)是新疆蘊(yùn)藏量大、耐鹽堿、生長快、易繁殖、藥用價(jià)值高的一種荒漠鹽生植物資源,新疆各地均有分布[1]。沙棗黃酮具有降低血清膽固醇、抑制血小板集聚、抗病毒和增強(qiáng)免疫力、清除羥基自由基、治療慢性氣管炎等功效[2-4]。因此,沙棗是一種具有開發(fā)利用前景的重要資源。但目前沙棗僅有少部分在民間藥用、食用或初步加工,大部分果和葉成熟后自然落地腐爛廢棄,利用率極低,造成這一寶貴資源的極大浪費(fèi)。為了提高沙棗中黃酮類化合物的提取率,進(jìn)而提高這一寶貴資源的應(yīng)用價(jià)值,我們對沙棗中黃酮類化合物的提取工藝進(jìn)行了研究。
1 材料
沙棗(石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院提供);蘆丁對照品(購自中國藥品生物制品檢定所)。亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇等,以上試劑均為分析純。 DL-360A超聲波清洗器(上海之信儀器有限公司);棱光牌722N可見分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司);電子天平(北京賽多利斯天平有限公司);循環(huán)水泵(河南鞏義市英峪予華儀器廠)等。
2 方法
2.1 最大吸收波長的確定
吸取0.2 g/mL的蘆丁對照品溶液1 mL,置于10 mL試管中,加入5%的NaNO2溶液0.3 mL,搖勻,靜置6 min;加入10%的Al(NO3)3溶液0.7 mL,搖勻,靜置6 min;加入10 mol/L的NaOH 溶液5 mL,用體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇定容至刻度,混勻,靜置15 min,以0號管未加樣液的顯色液為對照,在450～560 nm范圍內(nèi)測定吸光度。結(jié)果蘆丁對照品溶液的最大吸收波長為510 nm,在此位置有比較明顯的峰形,因此,本方法采用510 nm測定波長。
2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
試驗(yàn)采用常規(guī)的以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)物的分光光度法測定沙棗中黃酮類化合物[5],準(zhǔn)確吸取0.2 mg/mL蘆丁對照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分別置于25 mL的比色管中,依次加入5%NaNO2溶液0.3 mL,搖勻,放置6 min,再加入10%Al(NO3)3溶液0.3 mL,搖勻,放置6 min,最后加入4%NaOH溶液4.0 mL,用70%乙醇定容,搖勻,放置15 min,在510 nm處測定吸光度,采用最小二乘法,得回歸方程為：Y=9.735X-0.011 5,R2=0.999 9。
2.3 樣品含量測定
精確吸取1 mL樣品溶液于25 mL容量瓶中,加1 mL 5%NaNO2溶液,放置6 min,再加1 mL 10%Al(NO3)3溶液,放置6 min,最后加10 mL10%NaOH溶液,用蒸餾水定容放置16 min后,在510 nm處測定吸光度。由回歸方程計(jì)算樣品溶液中黃酮類化合物含量[黃酮類化合物含量=CD/W。C為樣品溶液中黃酮類化合物含量(mg/mL),D為樣品溶液稀釋后的總體積(mL),W為沙棗質(zhì)量(g)]。
2.4 黃酮類化合物提取的單因素試驗(yàn)
分別稱取粉碎的沙棗2.00 g,以物料比、乙醇濃度、溫度、時(shí)間作為考察因素,以黃酮提取率作為指標(biāo),進(jìn)行了如下試驗(yàn)。
2.4.1 物料比條件的選擇
初步選定乙醇濃度(70%)、溫度(30 ℃)、時(shí)間(30 min),在料液比梯度為1∶8、1∶10、1∶12、1∶14、1∶16、1∶18的條件下進(jìn)行單因素試驗(yàn)。
2.4.2 乙醇濃度條件的選擇
在“2.4.1”試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選定物料比(1∶16)、溫度(30 ℃)、時(shí)間(30 min),在乙醇濃度梯度為40%、50%、60%、70%、80%、90%的條件下進(jìn)行單因素試驗(yàn)。
2.4.3 溫度條件的選擇
在“2.4.2”試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選定物料比(1∶16)、時(shí)間(30 min)、乙醇濃度(70%),在溫度梯度為25、30、35、40、45、50 ℃的條件下進(jìn)行單因素試驗(yàn)。
2.4.4 時(shí)間條件的選擇
在“2.4.3”試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選定物料比(1∶16)、溫度(30 ℃)、乙醇濃度(70%),在時(shí)間梯度為10、15、20、25、30、35 min的條件下進(jìn)行單因素試驗(yàn)。
2.5 正交試驗(yàn)
根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,稱取粉碎的沙棗2.00 g,以物料比(A)、乙醇濃度(B)、提取溫度(C)、提取時(shí)間(D)為影響因素,黃酮提取率為判斷指標(biāo),選用L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn)(每個(gè)處理重復(fù)3次后取平均值),因素水平設(shè)置見表1。 表1 因素水平表(略)
3 結(jié)果與討論
3.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析
3.1.1 物料比對黃酮類化合物提取率的影響
在1∶8～1∶18范圍內(nèi),隨物料比的增大提取量逐漸增大,但是當(dāng)物料比為1∶14～1∶18時(shí),黃酮類化合物提取量增加緩慢。從浸提效果、減少溶劑用量和降低濃縮負(fù)荷等方面綜合考慮,選1∶12、1∶14、1∶16的物料比進(jìn)行正交試驗(yàn)。
3.1.2 乙醇濃度對黃酮類化合物提取率的影響
從40%～70%隨濃度的增加提取量逐漸增加,當(dāng)乙醇濃度為70%時(shí),黃酮類化合物提取量達(dá)到最大,之后隨乙醇濃度的增加提取量減少,由此可確定用60%、70%、80%的乙醇進(jìn)行正交試驗(yàn)。
3.1.3 溫度對黃酮類化合物提取率的影響
黃酮類化合物提取量隨溫度的增加而增加,但當(dāng)溫度為40～50 ℃時(shí),黃酮類化合物提取量增加緩慢。由此確定正交試驗(yàn)的溫度為35、40、45 ℃。
3.1.4 提取時(shí)間對黃酮類化合物提取率的影響
隨著提取時(shí)間的增加,提取量也增加,當(dāng)提取時(shí)間為10～25 min時(shí),黃酮類化合物提取量增加迅速,25～30 min之間提取量變化不大,由此確定正交試驗(yàn)的提取時(shí)間為20、25、30 min。
3.2 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析
試驗(yàn)結(jié)果顯示,最佳提取條件為70%的乙醇,1∶16的物料比,45 ℃的提取溫度,30 min的提取時(shí)間,即A3B2C3D3為最佳組合,其中,對提取結(jié)果影響大小依次為：乙醇濃度>物料比>提取時(shí)間>提取溫度。結(jié)果見表2。表2 正交試驗(yàn)極差分析(略)
3.3 驗(yàn)證試驗(yàn)
稱取沙棗20 g,根據(jù)篩選得到的最佳提取條件A3B2C3D3進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn),結(jié)果見表3。驗(yàn)證試驗(yàn)表明,在最佳提取條件下,黃酮類化合物提取率均大于正交設(shè)計(jì)中的提取率,所得結(jié)果正確。表3 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果(略)
4 結(jié)論
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用正交試驗(yàn),對沙棗中黃酮類化合物的提取條件進(jìn)行了優(yōu)化,提高了黃酮類化合物的提取效果。其中,對提取結(jié)果影響大小依次為：乙醇濃度>物料比>提取時(shí)間>提取溫度,最后確定提取沙棗中黃酮類化合物的最佳條件為：乙醇濃度70%,超聲時(shí)間30 min,超聲溫度45 ℃,固液比1∶16。
【參考文獻(xiàn)】
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