中學(xué)的基因科技論文范文(2)
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中學(xué)的基因科技論文范文篇二
卵巢癌的基因治療
【中圖分類號】R711 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-3783(2010)11-0077-02
卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的三大腫瘤之一，僅次于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌，但是因其早期無明顯臨床癥狀，致使等患者出現(xiàn)癥狀后再就醫(yī)往往為時已晚，所以其死亡率是婦科惡性腫瘤的首位。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展, 基因治療作為一種新的醫(yī)學(xué)技術(shù)得以迅速發(fā)展，為腫瘤的治療開創(chuàng)了新的領(lǐng)域。下面介紹幾種具有應(yīng)用前景的卵巢癌基因治療策略。
1 誘導(dǎo)細胞凋亡基因療法
誘導(dǎo)細胞凋亡基因療法是一種通過選擇性表達或?qū)肽承┩庠椿蛘T導(dǎo)腫瘤細胞凋亡,增強對化療的敏感性的有效基因療法。Survivin是最近新發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制基因,屬于凋亡抑制蛋白(inhibition apop tosis p rotein, IAP) 家族的新成員，所有分化成熟的組織中均檢測不到其表達，而大多數(shù)常見腫瘤組織內(nèi)如肺癌、胃癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌中表達異常升高[1]，其與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、血管生成、腫瘤的預(yù)后關(guān)系密切。
Wall等[2]應(yīng)用細胞分子生物學(xué)技術(shù)通過抑制Survivin基因蛋白的磷酸化過程來提高腫瘤細胞的凋亡率,從而達到治療腫瘤的目的。Survivin的多態(tài)序列中, 34位氨基酸為蘇氨酸,是細胞周期素依賴蛋白激酶P34cdc22的磷酸化點,該位點的磷酸化對維持Survivin的凋亡抑制功能非常重要。以丙氨酸取代后的突變體(T34A)可以使凋亡抑制功能喪失,以此突變體轉(zhuǎn)染Hela癌細胞,突變體的高度表達可以誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染細胞的自發(fā)性凋亡。經(jīng)證實,新一類的抗癌藥物GGTls中的GGTI-298 和GGTI-2166通過阻抑PBK/AKT和survivin途徑來誘導(dǎo)順鉑敏感和耐藥的人類卵巢上皮性癌細胞凋亡。在GGTI-298和GGTI-2166治療后, PBK和AKT激酶水平降低,生存素表達明顯減少。構(gòu)成上活化的AKT2和/或生存素的異位表達能明顯地復(fù)蘇被GGTI-298誘導(dǎo)凋亡的人類癌細胞。其前的研究顯示Akt調(diào)節(jié)生長因子誘導(dǎo)的生存素,而p53抑制生存素的表達。然而,構(gòu)成上活化的AKT2卻不能復(fù)蘇GGTIs下調(diào)生存素,再進一步, GGTIs在野生型p53和p53不足的卵巢癌細胞株中均能抑制存活素的表達并誘導(dǎo)細胞程序性死亡。這些資料表明GGTI-298和GGTI -2166不依賴于p53而針對PBK/AKT和survivin 類似途徑來誘導(dǎo)凋亡[3]。
2 抑制細胞信號傳導(dǎo)通路療法
研究表明,表皮生長因子受體(EGFR)在許多惡性腫瘤中呈高表達,并與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移、預(yù)后等密切相關(guān)。Shih等在腦細胞瘤中發(fā)現(xiàn)了原癌基因neu，Padly等證實該癌基因編碼的185kDa的蛋白質(zhì)P185neu與EGFR的基因一樣同CerbB具有同源序列，故將EGFR基因命名為CerbB-1(HER-1)，neu基因命名為CerbB-2(HER-2)。近年來，又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了CerbB-3(HER-3)CerbB-4(HER-4)，組成了EGFR家族。此家族成員均是具有酪氨酸蛋白激酶活性(TPK)的生長因子受體。
CerbB-2的過度表達與卵巢癌患者生存期、生存率及卵巢癌的耐藥性的發(fā)生密切相關(guān)�[4]。Herceptin作為人源性單克隆抗體, 與CerbB-2 的細胞外部分有高度親和力, 能靶向結(jié)合于表達CerbB-2的卵巢癌細胞, 阻斷配體介導(dǎo)的細胞信號傳導(dǎo)，影響上皮細胞生長，也可通過誘導(dǎo)抗體介導(dǎo)的細胞毒作用殺傷腫瘤細胞。Mauricio等通過將Herceptin 與腫瘤壞死因子聯(lián)合應(yīng)用于陽性的CerbB-2卵巢癌細胞系,發(fā)現(xiàn)Herceptin能通過抑制酪氨酸激酶來增強腫瘤壞死因子引起的細胞凋亡效應(yīng)。臨床應(yīng)用Herceptin治療CerbB-2陽性卵巢癌已取得良好的治療效果。
3 多重耐藥基因療法
卵巢癌化療失敗的根本原因是產(chǎn)生化療藥物耐藥性。研究發(fā)現(xiàn), 在對順鉑、阿霉素耐藥的卵巢癌細胞株中72%的細胞出現(xiàn)了MDR1 基因的過度表達。抑制MDR1 基因的表達, 不僅使細胞內(nèi)化療藥物濃度增加，也增強細胞對藥物的敏感性[5]。
卵巢癌多細胞球體多藥耐藥糖蛋白Pgp表達的升高與細胞周期素依賴性激酶抑制劑p27呈正相關(guān)[6]。p27可使細胞周期蛋白E和細胞周期依賴性蛋白激酶2的活性受到抑制，使細胞周期停滯在G1期，對細胞周期進行負調(diào)控。Xing[7]將p27ASON經(jīng)脂質(zhì)體包裹轉(zhuǎn)染人卵巢癌細胞A2780、CAOV3，用錐蟲藍排除實驗法和流式細胞儀檢測細胞凋亡率來分別比較單層細胞p27ASON轉(zhuǎn)染前后培養(yǎng)的多細胞球體的紫杉醇敏感性，結(jié)果表明，p27ASON可以下調(diào)p27的表達，防止細胞間黏附并促進細胞增殖而下調(diào)Pgp的表達，從而一定程度逆轉(zhuǎn)卵巢癌對紫杉醇化療的耐藥性。
4 突變補償療法
突變補償是消除主要致腫瘤基因,取代改變的腫瘤抑制基因,或干擾某些生長因子及其受體的功能。將特異性基因?qū)肽[瘤細胞,糾正腫瘤細胞的基因缺陷,使細胞周期停滯、誘導(dǎo)細胞程序性死亡或使腫瘤細胞對化療和放療敏感。編碼人類免疫缺陷腺病毒與野生型P53 (SCH58500)重組體腹膜注射有良好療效,既安全又可耐受,并且聯(lián)合鉑類化療在復(fù)發(fā)性卵巢癌患者有更好的效果。
目前研究最為深入的抑癌基因為P53。在30%～79%卵巢癌中出現(xiàn)了P53異常。實驗證明野生型P53基因轉(zhuǎn)染到有P53 基因突變的卵巢癌細胞,既抑制腫瘤的生長,又具有旁觀者效應(yīng)[2]。2005年Ad-P53基因治療獲準進行Ⅲ期臨床試驗，現(xiàn)我國重組人P53腺病毒(今又生)廣泛應(yīng)用于臨床卵巢癌的治療并取得了良好的治療效果。
5 反義基因療法
它是利用反義技術(shù)設(shè)計與異常激活有害基因及其mRNA互補的反義寡核苷酸,特異性封閉這些基因使其不表達或低表達,從而達到減少基因產(chǎn)物,抑制細胞惡變的作用。由于該療法是從核酸角度著眼,故而是一種最根本、最有前途的治療方法。Fei R[8]針對CerbB-2基因和c-myc基因,聯(lián)合抗基因治療,靶向CerbB-2和c-myc,抑制卵巢癌細胞COC(1)細胞增殖和CerbB-2及c-myc基因表達。c-raf-1可被ras基因激活之外還存在獨立的激活途徑:可被酪氨酸激酶src與JAK1、蛋白激酶Cα、神經(jīng)酰胺活化的蛋白激酶等激活。因而c-raf-1是EGFR介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)上的關(guān)系基因之一[9],c-raf-1是理想的基因治療靶點。CerbB-2 ASODN 與CerbB-2 mRNA 5’端編碼區(qū)互補,Craf-1 ASODN 與Craf-1 mRNA 3’端非編碼區(qū)互補。Pirollo等針對raf-1、H-ras、CerbB-2基因設(shè)計合成的硫代ASO,不僅能抑制卵巢癌細胞生長,而且能增加對放療的敏感性。
Zaffaroni等[10]在體外和體內(nèi)的研究中利用針對Survivin的反義寡苷酸治療腫瘤,發(fā)現(xiàn)腫瘤的生長速度減慢,并且可以提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性,如紫杉醇、順鉑和鬼臼乙叉甙及對照射和免疫治療的敏感性。研究表明靶向抑制survivin基因表達在腫瘤治療中有巨大的潛在價值。
等針對端粒酶hTERT設(shè)計合成反義脫氧寡核苷酸,對卵巢癌細胞系SKOV3及ES-2進行反義基因治療,能通過抑制端粒酶活性,增強細胞周期阻滯及誘導(dǎo)細胞凋亡等抑制卵巢癌細胞生長,與CDDP合用能增強對癌細胞的殺傷作用。
基因治療為卵巢癌的治療展現(xiàn)了一個極有希望的前景。學(xué)者們正針對卵巢癌的基因治療中存在的一些問題,研究載體改良,增強目的基因靶向性等,迎接根治卵巢癌的挑戰(zhàn)。相信隨著人類基因組計劃的完成,分子生物學(xué)等學(xué)科的進一步深入發(fā)展,人類將開辟卵巢癌基因治療的新紀元。
參考文獻
[1] Kim HS, Shiraki K, Park SH. Exp ression of survivin in CN andinvasive squamous cell carcinoma of uterine cervix[J]. Antican2cer Research, 2002, 22 (2A):805-808
[2] WallNR, O’ConnorDS, Plescia J, et al. Sup ression of survivingphosphorylation on Thr34 by flavop iridol enhances tumor cell ap-optosis[J]. Cancer Res, 2003, 63(1):230-235
[3] Dan HC, J ing K, Coppola D, et al. Phosphatidylinositol-3-OHkinase /AKL and survivin pathways as critical targets for gera-nylgeranyltransferase I inhibitor-induced apop tosis [J]. Onco-gene, 2004, 23(3):706-715
[4] Menendez JA, Vellon L, Mehmi I, et al. Inhibition of fatty acid synthase (FAS) suppresses HER2/neu (erbB- 2) oncogene overexpression in cancer cells[J]. PNAS, 2004, 101(29):10715~ 10712
[5] Zhang T, Guan M, Jin HY, et al. Reversal of multidrug resistanceby small interfering double-stranded RNAs in ovarian cancercells[J]. Gynecol Oncol, 2005, 97(2):501~ 507
[6] Wartenberg M,Ling FC,Schallenberg M,et al.Down -regulation of intrinsic P-glycoprotein expression in multicellular prostate tumor spheroids by reactive oxygen species.Biol Chem,2001,276(20);17420-17428
[7] Xing H,Li J,Gao QL,et al.impact of cychn-dependent kinase inhibitor p27 on resistance of ovarian cancer multicelluar spheroids to taxol.Zhonghua Yi Xue Za Zhi,2003,83(1):37-41
[8] Fei R, Shaoyang L. Combination antigene therapy targetingc-myc and c-erbB (2) in the ovarian cancer COC (1) cellline [J]. GynecolOncol, 2002, 85(1):40-44
[9] Yuan B,MiR. Antisenseoligodeoxynucleondes ofhumantelomerse catalyticsub-unitinhibitstelomeraseactivity andproliferationin SKOV3 and COC1.Chin JObstetGynecol,2002,37(4):198-201
[10] Zaffaroni N, Daidone MG. Survivin exp ression and resistance toanti-cancer treatments:perspectives for new therapeutic interventions[J]. Drug Resist Updat, 2002, 5(2):65-72
作者單位：215123 蘇州工業(yè)園區(qū)婁葑醫(yī)院婦產(chǎn)科(江蘇 蘇州)
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