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微生物技術(shù)論文2000字(2)

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  微生物技術(shù)論文2000字篇二

  食品微生物檢驗(yàn)中無菌操作技術(shù)研究

  摘 要:進(jìn)行食品微生物檢驗(yàn)時(shí),對(duì)采樣、取樣及檢驗(yàn)等環(huán)節(jié)嚴(yán)格的進(jìn)行無菌操作的目的是為了得到反映食品衛(wèi)生質(zhì)量的準(zhǔn)確數(shù)據(jù),如果任意一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題,那么都有可能導(dǎo)致檢驗(yàn)的結(jié)果出現(xiàn)誤差,檢驗(yàn)也就失去意義。在檢驗(yàn)過程中,要防止不規(guī)范的操作導(dǎo)致污染的發(fā)生,除此以外,加強(qiáng)無菌操作也是為了對(duì)檢驗(yàn)人員自身安全的保護(hù)。

  關(guān)鍵詞:食品衛(wèi)生 微生物檢驗(yàn) 無菌操作 保護(hù)

  中圖分類號(hào):TS207 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1672-3791(2014)05(b)-0040-02

  進(jìn)行食品微生物檢驗(yàn)是對(duì)食品中的菌落總數(shù)、致病菌、霉菌、大腸菌群及酵母菌等繁殖情況進(jìn)行測定,對(duì)被測食品的衛(wèi)生情況進(jìn)行評(píng)價(jià),從而為衛(wèi)生、安全的食品生產(chǎn)提供依據(jù)。微生物在自然界中廣泛的分布,食品中的脂肪、蛋白質(zhì)及糖等也為微生物的生存提供了條件,也因此在檢驗(yàn)中檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性極容易受到干擾,為了保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,必須在采樣、取樣及檢驗(yàn)等過程中進(jìn)行無菌操作。

  1 無菌操作及注意事項(xiàng)

  所謂無菌,指的是環(huán)境中不存在保證生命活動(dòng)的營養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)。而無菌操作則是采用無菌器材進(jìn)行植物組織、細(xì)胞傳代、細(xì)胞接種等培養(yǎng)操作,防止微生物進(jìn)入無菌范圍,在微生物檢驗(yàn)中,無菌操作是重要的理念,只有在檢測設(shè)備、培養(yǎng)菌無菌的基礎(chǔ)上,才能確保樣品不被污染,檢驗(yàn)的結(jié)果才能更準(zhǔn)確。一定程度上可以將無菌操作理解為安全操作。

  在進(jìn)行無菌操作時(shí)應(yīng)該注意以下幾個(gè)方面:(1)按照食品微生物檢驗(yàn)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),對(duì)于一般的檢驗(yàn)樣品要在干凈的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,包含實(shí)驗(yàn)室、工作臺(tái)等,而對(duì)于病原微生物分離工作則需要在生物二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。要保證無菌室的清潔,定期對(duì)墻壁、桌面、臺(tái)面等進(jìn)行消毒,在使用之前,要先用紫外線燈照射30 min。對(duì)實(shí)驗(yàn)室沉降菌定期進(jìn)行計(jì)數(shù),對(duì)微生物生長繁殖情況進(jìn)行檢查,在無菌室內(nèi)盡量減少走到,禁止在無菌室內(nèi)談笑。(2)進(jìn)入無菌室前,檢驗(yàn)人員要洗手,在緩沖室更換工作衣、鞋、帽等,無菌室外的工作衣、鞋、帽等嚴(yán)格禁止進(jìn)入無菌室。(3)在微生物檢驗(yàn)過程中,打開樣品時(shí),檢驗(yàn)人員要與樣品保持一定距離,沒有經(jīng)過消毒的物體不能接觸樣品,樣品暴露在空氣中的時(shí)間要盡可能的短,采用無菌工具取樣,檢驗(yàn)人員的手臂不能放置在樣品上方,取出的樣品不能再放回原處。操作要慢,速度不能過快,接種用具在使用前和使用后都必須精要灼燒滅菌,吸管不能直接用嘴吸。(4)在開啟袋口、瓶口之前,要用酒精棉球擦拭消毒,對(duì)液體培養(yǎng)物接種時(shí),不能使菌液濺在其它器皿或工作臺(tái)上,防止污染,如果不小心濺到,用酒精棉球灼燒滅菌,最后用消毒液擦干凈。帶有菌液的玻片或吸管,最后要在消毒液中消毒。(5)無菌物品應(yīng)該分類放置,定期檢查,不能和沒有滅菌的物品混放。

  2 無菌操作技術(shù)

  2.1 顯微鏡技術(shù)

  由于微生物非常小,肉眼很難觀察,因此必須借助顯微鏡進(jìn)行觀察,光學(xué)顯微鏡是實(shí)驗(yàn)室微生物形態(tài)觀察的常用儀器。在使用顯微鏡技術(shù)使,染色、涂片等技術(shù)必不可少,不管是染色還是涂片時(shí),都要進(jìn)行無菌操作,防止雜菌污染,一旦玻片受到污染,觀察的結(jié)果就會(huì)受到影響。所以,在操作的過程中,為了實(shí)現(xiàn)無菌操作,應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):第一,對(duì)平板培養(yǎng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室觀察時(shí),通常不進(jìn)行開蓋觀察,可以對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行開蓋檢查,例如在移植培養(yǎng)或取樣涂片時(shí),可以適度開縫,但是不能完全揭開;第二,進(jìn)行涂片時(shí),玻片必須用架子夾持,不能用手直接接觸玻片,避免細(xì)菌感染;第三,用過的玻片要進(jìn)行消毒處理。

  2.2 無菌操作技術(shù)

  進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí),菌種的接種、分離及移植等操作必須排除雜菌干擾,才能得到符合要求的培養(yǎng)體。這就需要一個(gè)無雜菌污染的工作環(huán)境,在這個(gè)環(huán)境內(nèi)嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,才能最大限度保證操作的安全性。一般情況下,無菌接種可以在酒精燈旁進(jìn)行,如果要求比較嚴(yán)格,可以在無菌室內(nèi)配合生物安全柜或超凈工作臺(tái)進(jìn)行操作。

  無菌操作技術(shù)主要包含三個(gè)方面:無菌環(huán)境、無菌器材及無菌操作。首先,無菌環(huán)境。這是相對(duì)而言的,在無菌室內(nèi),一般可以提供無菌環(huán)境,但是需要生物安全柜等隔離設(shè)備,對(duì)有害懸浮微粒進(jìn)行隔離,從而保證樣品、環(huán)境及操作人員的安全。在無菌室布置時(shí),要合理布局,滿足操作安全、方便及成本適中等要求。對(duì)于生物安全柜而言,容易消毒滅菌、體積小、可移動(dòng),但是在操作中不是很方便,對(duì)一般接種操作比較適用,如致病菌檢驗(yàn)接種操作;而超凈工作臺(tái)在目前經(jīng)常使用,其無菌狀態(tài)主要通過超細(xì)過濾無菌空氣實(shí)現(xiàn)的。其次,無菌器材。用于微生物檢驗(yàn)的無菌器材可分為:器材滅菌與器材消毒。對(duì)于器材滅菌而言,只要是在檢驗(yàn)過程中使用到的器材,除過不能進(jìn)行滅菌處理的,都要進(jìn)行滅菌處理,如稀釋劑、培養(yǎng)基、玻璃器皿、乳膠頭及膠管等,對(duì)于金屬器材的滅菌,要先用包裝紙包裹后再進(jìn)行;對(duì)于器材消毒而言,只要是針對(duì)檢驗(yàn)中使用的不能用滅菌處理的器材,則要進(jìn)行消毒處理,例如工作服、天平、試管架等,一般采用化學(xué)藥品噴灑、擦拭或熏蒸等方法。最后,無菌操作。無菌操作在上文已經(jīng)分析過,在此不作具體說明。

  2.3 純種分離技術(shù)

  為了對(duì)食品微生物的種群進(jìn)行鑒定,則要進(jìn)行分離,獲取某一菌株的純培養(yǎng)物,這個(gè)過程稱之為微生物分離和純化。為了獲取某一種微生物的純培養(yǎng)物,通常按照該微生物的特性,設(shè)計(jì)適合的培養(yǎng)條件與培養(yǎng)基,使該微生物進(jìn)行生長與繁殖,或者是加入抑制其它微生物生長的抑制因素,從而淘汰掉其它雜菌。通過各種稀釋法,最終在培養(yǎng)基上形成單菌落。此時(shí)還不能保證一定屬于純培養(yǎng),還需要進(jìn)行分離、純化及鑒定。使用比較多的分離純化方法主要有平板劃線分離法、稀釋混合倒平板法、稀釋搖管法、稀釋涂布平板法、單細(xì)胞分離法、液體培養(yǎng)基分離法等。其中平板劃線分離法、稀釋混合倒平板法及稀釋涂布平板法是最長用的三種分離純化方法,不需要其他設(shè)備,而且分離的效果非常好。

  2.4 純種培養(yǎng)技術(shù)

  檢驗(yàn)中,從一個(gè)器皿到另外一個(gè)培養(yǎng)容器中,經(jīng)常采用接種環(huán)接種的方法進(jìn)行,因?yàn)榄h(huán)境中存在著諸多的污染物,一旦器皿打開,環(huán)境中的污染物就有可能對(duì)器皿內(nèi)的培養(yǎng)物或培養(yǎng)基造成污染,所以,進(jìn)行菌種移接時(shí),必須要在無菌環(huán)境下嚴(yán)格按照無菌操作進(jìn)行。微生物實(shí)驗(yàn)及嚴(yán)重,接種以一項(xiàng)基本的操作技術(shù),如果由于操作不規(guī)范造成污染,那么檢驗(yàn)的結(jié)果也就失去意義,對(duì)下一環(huán)節(jié)的操作也會(huì)帶來影響。由此可見,盡可能的降低工作環(huán)境中的雜菌污染外,還要對(duì)各種無菌操作技術(shù)熟練的掌握。

  3 結(jié)語

  微生物在自然界中廣泛的存在,在進(jìn)行食品微生物檢驗(yàn)中,必須要注重?zé)o菌操作,防止雜菌的混入,在進(jìn)行分離、接種等操作時(shí),也要嚴(yán)格采用無菌操作技術(shù)。實(shí)際上,人工無菌環(huán)境并非真正的無菌,這只是相對(duì)而言的,絕對(duì)的無菌是不存在的。所以,在檢驗(yàn)的過程中為了不受其它微生物的污染,無菌操作就非常重要了,要求檢驗(yàn)人員必須對(duì)無菌操作技術(shù)熟練的掌握。

  參考文獻(xiàn)

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