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2017高考生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)梳理

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2017高考生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)梳理

  備戰(zhàn)高考,了解生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)也非常關(guān)鍵,下面學(xué)習(xí)啦小編整理的高考生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)梳理,希望對(duì)你有幫助。

  高考生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)梳理

  實(shí)驗(yàn)一 使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞

  1、是低倍鏡還是高倍鏡的視野大,視野明亮?為什么?

  低倍鏡的視野大,通過(guò)的光多,放大的倍數(shù)小;高倍鏡視野小,通過(guò)的光少,但放大的倍數(shù)高。

  2、為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察?

  如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對(duì)象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。

  3、用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過(guò)高倍鏡后,轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋行不行?

  不行。用高倍鏡觀察,只需轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋即可。轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,容易壓壞玻片。

  4、使用高倍鏡觀察的步驟和要點(diǎn)是什么?

  答:(1)首先用低倍鏡觀察,找到要觀察的物像,移到視野的中央。

  (2)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,用高倍鏡觀察,并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,直到看清楚材料為止。

  5、總結(jié):四個(gè)比例關(guān)系

  a.鏡頭長(zhǎng)度與放大倍數(shù):物鏡鏡頭越長(zhǎng),放大倍數(shù)越大,而目鏡正好與之相反。

  b.物鏡頭放大倍數(shù)與玻片距離:倍數(shù)越大(鏡頭長(zhǎng))距離越近。

  c.放大倍數(shù)與視野亮度:放大倍數(shù)越大,視野越暗。

  d.放大倍數(shù)與視野范圍:放大倍數(shù)越大,視野范圍越小。

  實(shí)驗(yàn)二 檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。

  1、可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。

  葡萄糖+ Cu ( OH )2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓(磚紅色)+ H 2O,即Cu ( OH ) 2被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

  2、脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍(lán)色。

  3、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。)

  二、實(shí)驗(yàn)材料

  1、做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn),應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋(píng)果、梨。(因?yàn)榻M織的顏色較淺,易于觀察。)

  2、做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡3~4小時(shí)(也可用蓖麻種子)。

  3、做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。

  三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

  1、可溶性糖的鑒定

  a.應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲(chǔ)存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時(shí),生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水;

  b. 切勿將甲液、乙液分別加入蘋(píng)果組織樣液中進(jìn)行檢測(cè)。甲、乙液分別加入時(shí)可能會(huì)與組織樣液發(fā)生反應(yīng),無(wú)Cu ( OH ) 2生成。

  2、蛋白質(zhì)的鑒定

  a. A液和B液也要分開(kāi)配制,儲(chǔ)存。鑒定時(shí)先加A液后加B液;先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時(shí)加入,會(huì)導(dǎo)致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。

  b、CuSO4溶液不能多加;否則CuSO4的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)顏色。

  c. 蛋清要先稀釋;如果稀釋不夠,在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。

  3、斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別:

  斐林試劑

  雙縮脲試劑

  試劑成分

  0.1g/mlNaOH溶液

  0.1g/mlNaOH溶液(雙縮脲試劑A)

  0.05g/mlCuSO4溶液

  0.01g/mlCuSO4溶液(雙縮脲試劑B)

  是否混合

  混合后再滴加

  先加雙縮脲試劑A后加雙縮脲試劑B

  是否加熱

  水浴加熱

  不加熱

  實(shí)驗(yàn)三 觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布

  實(shí)驗(yàn)原理:

  1.甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色,可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。

  2.鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)使染色體中的DNA和蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。

  實(shí)驗(yàn)四 體驗(yàn)制備細(xì)胞膜的方法

  實(shí)驗(yàn)材料:人和其他哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器,用這樣的紅細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料就只有細(xì)胞膜一種膜結(jié)構(gòu)。

  實(shí)驗(yàn)五 用高倍顯微鏡觀察線粒體和葉綠體

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  1.葉綠體的辨認(rèn)依據(jù):葉綠體是綠色的,呈扁平的橢圓球形或球形。

  2.線粒體辨認(rèn)依據(jù):線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。

  3.健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料,可以使活細(xì)胞中線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色

  二、實(shí)驗(yàn)材料

  觀察葉綠體時(shí)選用:蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體清楚,可取整個(gè)小葉直接制片,所以作為實(shí)驗(yàn)的首選材料。

  若用菠菜葉作實(shí)驗(yàn)材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因?yàn)楸砥ぜ?xì)胞不含葉綠體。

  三、討論

  1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體,是不是靜止不動(dòng)的?為什么?

  答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運(yùn)動(dòng),這種運(yùn)動(dòng)能隨時(shí)改變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。

  2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能有什么關(guān)系?

  答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細(xì)胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。

  實(shí)驗(yàn)六 觀察植物細(xì)胞的吸水和失水

  一、實(shí)驗(yàn)原理:

  1.質(zhì)壁分離的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過(guò)滲透作用而失水,細(xì)胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁分離。

  2.質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過(guò)滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來(lái)的狀態(tài),緊貼細(xì)胞壁,使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。

  二、實(shí)驗(yàn)材料和方法:

  紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因?yàn)橐号莩首仙?,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對(duì)細(xì)胞無(wú)毒害作用。

  質(zhì)壁分離的方法(引流法):制作洋蔥鱗片葉外表皮的臨時(shí)裝片。然后,從蓋玻片的一側(cè)滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在蓋玻片的另一側(cè)用吸水紙吸引。這樣重復(fù)幾次即可。

  質(zhì)壁分離復(fù)原的方法:改用清水實(shí)驗(yàn)。

  三、討論

  1.如果將上述表皮細(xì)胞浸潤(rùn)在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?答:表皮細(xì)胞維持原狀,因?yàn)榧?xì)胞液的濃度與外界溶液濃度相等。

  2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離?為什么?

  答:不會(huì)。因?yàn)榧t細(xì)胞不具細(xì)胞壁。

  實(shí)驗(yàn)七 比較過(guò)氧化氫在不同條件下的分解

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  鮮肝提取液中含有過(guò)氧化氫酶,過(guò)氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經(jīng)計(jì)算,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液中過(guò)氧化氫酶分子數(shù)的25萬(wàn)倍。

  二、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

  1.不讓H2O2接觸皮膚,H2O2有一定的腐蝕性

  2. 不可用同一支滴管,由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過(guò)氧化氫酶,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性

  3.肝臟研磨液必須是新鮮的,因?yàn)檫^(guò)氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過(guò)久,可受細(xì)菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低

  4.肝臟研磨要充分,研磨可破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu),使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放出來(lái),增加酶與底物的接觸面積。

  實(shí)驗(yàn)八 影響酶活性的條件

  實(shí)驗(yàn)原理:

  1、淀粉遇碘后,形成紫藍(lán)色的復(fù)合物。

  2、淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖,麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。

  注:市售a-淀粉酶的最適溫度約600C

  實(shí)驗(yàn)九 探究酵母菌的呼吸方式

  實(shí)驗(yàn)原理:

  1、酵母菌是一種單細(xì)胞真菌,在有氧和無(wú)氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來(lái)研究細(xì)胞呼吸的不同方式。方程式(略)

  2、CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時(shí)間長(zhǎng)短,可以檢測(cè)酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。

  3、橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),在酸性條件下,變成灰綠色。

  注意事項(xiàng):增加水中氧氣的方法:用橡皮球或氣泵通入空氣,并用NaOH溶液除去空氣中的CO2

  實(shí)驗(yàn)十 葉綠體色素的提取和分離

  一、實(shí)驗(yàn)原理與方法

  1.色素的提取原理:葉綠體中的色素是有機(jī)物,不溶于水,易溶于丙酮等有機(jī)溶劑中。提取方法:用丙酮、乙醇等能提取色素。

  2.色素分離的原理:層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢。分離方法:紙層析法。用毛細(xì)吸管在濾紙條的下端沿鉛筆線劃一條濾液細(xì)線,待濾液干后再劃一兩次,然后將濾紙條插入層析液中(濾液細(xì)線不能接觸層析液)。分離結(jié)果:濾紙條上從上到下出現(xiàn)四條色素帶:橙黃色(最窄,胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍(lán)綠色(最寬,葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。胡蘿卜素與葉黃素之間距離最大,葉綠素a與葉綠素b之間距離最小。

  二、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

  1.加SiO2為了研磨得更充分。

  2.加CaCO3防止研磨時(shí)葉綠素受到破壞。因?yàn)槿~綠素含鎂,可被細(xì)胞液中的有機(jī)酸產(chǎn)生的氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機(jī)酸,防止葉綠體被破壞。

  3.加無(wú)水乙醇是因?yàn)槿~綠體色素易溶于無(wú)水乙醇等有機(jī)溶劑。

  三、實(shí)驗(yàn)討論:

  1.濾紙條上的濾液細(xì)線,為什么不能觸及層析液?

  答:濾紙條上的濾液細(xì)線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會(huì)溶解在層析液中,實(shí)驗(yàn)就會(huì)失敗。

  2.提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么?

  答:提取葉綠體色素的關(guān)鍵是:①葉片要新鮮、濃綠;②研磨要迅速、充分;③濾液收集后,要及時(shí)用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關(guān)鍵是:一是濾液細(xì)線要細(xì)且直,而且要重復(fù)劃幾次;二是層析液不能沒(méi)及濾液線。

  實(shí)驗(yàn)十一 環(huán)境因素對(duì)光合作用強(qiáng)度的影響

  實(shí)驗(yàn)原理:

  1、影響光合作用強(qiáng)度的因素有光照強(qiáng)度,二氧化碳濃度,溫度,水分,礦質(zhì)元素等等, 測(cè)光合作用強(qiáng)度可以通過(guò)測(cè)氧氣生成速率來(lái)進(jìn)行間接的測(cè)量。

  2、利用真空滲入法排出葉片細(xì)胞間隙中的空氣。并使其沉入水中,在光合作用過(guò)程中,植物吸收二氧化碳并放出氧氣,產(chǎn)生氧氣的多少與光合作用強(qiáng)度密切相關(guān),由于氧氣在水中溶解度很小,因此氧氣會(huì)在細(xì)胞間隙中積累,從而使下沉的葉片上浮。依據(jù)葉片上浮的情況可推知葉片光合作用強(qiáng)度,可以用葉片上浮所需的平均時(shí)間或者一定時(shí)間內(nèi)上浮的葉片數(shù)表示光合作用強(qiáng)度的大小。

  實(shí)驗(yàn)十二 細(xì)胞大小與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)年P(guān)系

  一、實(shí)驗(yàn)原理:用瓊脂塊模擬細(xì)胞。瓊脂塊中含有酚酞,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(zhì)(NaOH)在瓊脂塊中的擴(kuò)散速度。方法:用含酚酞的瓊脂塊模擬細(xì)胞。2、現(xiàn)象:NaOH和酚酞相遇呈紫紅色。

  二、結(jié)論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小;NaOH擴(kuò)散的體積與整個(gè)瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。

  實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)

  1、模型方法。

  模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對(duì)認(rèn)識(shí)對(duì)象所作的一種簡(jiǎn)化的概括性的描述,模型包括物理模型、數(shù)學(xué)模型、概念模型等。⑴以事物或圖畫(huà)形式直觀地表達(dá)認(rèn)識(shí)對(duì)象的特征,這種模型就是物理模型,沃森和克里克制作的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,就是物理模型。⑵數(shù)學(xué)模型是用來(lái)描述一個(gè)系統(tǒng)或它的性質(zhì)的數(shù)學(xué)形式。如“J”型增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型:t年后種群數(shù)量為Nt=N0 t 。建立數(shù)學(xué)模型的步驟:①觀察研究對(duì)象,提出問(wèn)題。②提出合理的假設(shè)。③根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),用適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)形式對(duì)事物的性質(zhì)進(jìn)行表達(dá)。④通過(guò)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)或觀察等,對(duì)模型進(jìn)行檢驗(yàn)或修正。

  2、調(diào)查種群密度的方法。

 ?、艠臃椒ǎm用于植物。①取樣的原則:隨機(jī)取樣。②取樣的方法:五點(diǎn)取樣法和等距取樣法。樣方的大小一般以1m2的正方形為宜。③計(jì)算方法:以所有樣方種群密度的平均值作為該種群的種群密度估計(jì)值。

 ?、茦?biāo)志重捕法,適用于活動(dòng)范圍大的動(dòng)物。另外,活動(dòng)范圍小的動(dòng)物(如作物植株上的蚜蟲(chóng)、跳蝻)可用樣方法;土壤小動(dòng)物可用捕捉器取樣法;趨光性昆蟲(chóng)可用燈光誘捕法。

 ?、浅闃訖z測(cè)法,適用于微生物(如酵母菌)。

  3、同位素標(biāo)記法。

  放射性同位素可用于追蹤物質(zhì)的運(yùn)行和變化規(guī)律。通過(guò)追蹤放射性同位素標(biāo)記的化合物,可以弄清化學(xué)反應(yīng)的詳細(xì)過(guò)程。這種方法叫做同位素標(biāo)記法。此方法用于:⑴探究分泌蛋白的合成和運(yùn)輸途徑:核糖體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 高爾基體 細(xì)胞外。⑵證明光合作用釋放的氧氣來(lái)自水。⑶噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)。⑷DNA半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)。

  4、孟德?tīng)柕膶?shí)驗(yàn)方法(成功原因):⑴正確地選用實(shí)驗(yàn)材料;⑵先研究一對(duì)相對(duì)性狀的的遺傳,再研究?jī)蓪?duì)或多對(duì)性狀的遺傳;⑶應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析;⑷假說(shuō)—演繹法:先提出問(wèn)題,然后提出解釋問(wèn)題的假說(shuō),根據(jù)假說(shuō)進(jìn)行演繹推理,再通過(guò)實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)演繹推理的結(jié)論。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期結(jié)論相符,就證明假說(shuō)是正確的。

  5、類比推理法。薩頓根據(jù)類比推理提出了基因位于染色體上的假說(shuō)。

  6、排除法。達(dá)爾文運(yùn)用排除法研究植物表現(xiàn)向光性的原因。

  7、人工異花傳粉的方法:①去雄,套袋。②傳粉,套袋

  實(shí)驗(yàn)十三 觀察細(xì)胞的有絲分裂

  一、實(shí)驗(yàn)原理:

  1.在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見(jiàn)于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個(gè)細(xì)胞的分裂是獨(dú)立進(jìn)行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時(shí)期的細(xì)胞。

  2.染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過(guò)在高倍顯微鏡下觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期,進(jìn)而認(rèn)識(shí)有絲分裂的完整過(guò)程。

  二、觀察細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)過(guò)程

  步驟

  注意問(wèn)題

  分析

  二、裝片的制作

  (解離→漂洗→染色→制片)

  1.解離:

  解離液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的混合液(1:1)

  解離時(shí)間要保證,細(xì)胞才能分散開(kāi)來(lái)。

  解離時(shí)間也不宜過(guò)長(zhǎng)。

  目的:溶解細(xì)胞間質(zhì),使組織中的細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái)。此時(shí),細(xì)胞已被鹽酸殺死。

  否則,根尖過(guò)于酥軟,無(wú)法取出。

  2.漂洗:清水的玻璃皿中漂洗約10 min。

  漂洗要充分,可換水1~2次。

  目的:洗去解離液,便于染色。

  3.染色:質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。

  染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則顯微鏡下一片紫色,無(wú)法觀察。

  龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色

  4.制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來(lái),放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。

  要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動(dòng)蓋玻片,

  目的:使細(xì)胞分散,避免細(xì)胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標(biāo)本被壓成云霧狀。

  三、觀察

  1.低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動(dòng)裝片,找到分生區(qū)細(xì)胞。

  2.高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細(xì)觀察,找出處于細(xì)胞分裂期中期的細(xì)胞,再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。

  一定要找到分生區(qū)。

  在一個(gè)視野里,往往不容易找全有絲分裂過(guò)程中各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞??梢月匾苿?dòng)裝片,從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。

  分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn)是:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正處于分裂期。

  三、討論

  制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?

  答:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點(diǎn):

  (1)剪取洋蔥根尖材料時(shí),應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時(shí)間;

  (2)解離時(shí),要將根尖細(xì)胞殺死,細(xì)胞間質(zhì)被溶解,使細(xì)胞容易分離;

  (3)壓片時(shí),用力的大小要適當(dāng),要使根尖被壓平,細(xì)胞分散開(kāi)

  實(shí)驗(yàn)十五 低溫誘導(dǎo)染色體加倍

  一、實(shí)驗(yàn)原理與步驟:

  原理:用低溫處理植物分生組織細(xì)胞,能抑制紡錘體的形成,以致影響染色體被拉向兩極,細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞,于是,植物細(xì)胞的染色體數(shù)發(fā)生變化。

  步驟:⑴低溫誘導(dǎo)。⑵卡諾氏液中浸泡以固定細(xì)胞的形態(tài),再用95%的酒精沖洗2次。⑶制作裝片(解離、漂洗、染色、制片)。⑷顯微鏡觀察。

  二、課后討論題答案:

  低溫誘導(dǎo)和秋水仙素處理都是通過(guò)抑制分裂細(xì)胞內(nèi)紡錘體的形成,使染色體不能移向細(xì)胞兩極,而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍??ㄖZ氏固定液(Carnoy's Fluid) 適用于一般植物組織和細(xì)胞的固定,常用于根尖,花藥壓片及子房石蠟切片等.有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花藥則需1h左右,此液固定最多不超過(guò)24h,固定后用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;如果材料不馬上用,需轉(zhuǎn)入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透細(xì)胞,將其固定并維持染色體結(jié)構(gòu)的完整性,還要能夠增強(qiáng)染色體的嗜堿性,達(dá)到優(yōu)良染色效果。

  配方:無(wú)水酒精3份、冰醋酸1份、或無(wú)水乙醇6份,氯仿3份,冰醋酸1份。

  實(shí)驗(yàn)十六 調(diào)查常見(jiàn)的人類遺傳病

  一、實(shí)驗(yàn)原理與步驟:

  原理:顯性遺傳病具有世代相傳的特點(diǎn),隱性遺傳病隔代出現(xiàn)。伴X染色體隱性遺傳病的遺傳特點(diǎn)是交叉遺傳,隔代出現(xiàn),患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺傳病的遺傳特點(diǎn)是世代相傳,患者女性多于男性。

  步驟:①確定要調(diào)查的遺傳病,掌握其癥狀及表現(xiàn) ②設(shè)計(jì)記錄表格及調(diào)查要點(diǎn)③分多個(gè)小組調(diào)查,獲得足夠大的群體調(diào)查數(shù)據(jù)④匯總結(jié)果,統(tǒng)計(jì)分析

  二、注意事項(xiàng):

  1、調(diào)查時(shí),最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病,如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等

  2、為保證調(diào)查的群體足夠大,小組調(diào)查的數(shù)據(jù),應(yīng)在班級(jí)和年級(jí)中進(jìn)行匯總

  某遺傳病的發(fā)病率=某種遺傳病的患病人數(shù)/某種遺傳病的被調(diào)查人數(shù)

  實(shí)驗(yàn)十七 探究生長(zhǎng)素類似物促進(jìn)插條生根的最適濃度

  一、實(shí)驗(yàn)原理:

  植物插條經(jīng)生長(zhǎng)素類似物處理后,對(duì)植物插條的生根情況有很大的影響,而且用不同濃度、不同時(shí)間處理其影響程度亦不同。其影響存在一個(gè)最適濃度,在此濃度下植物插條的生根數(shù)量最多,生長(zhǎng)最快。

  二、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

  1. 選擇插條:以1年生苗木為最好(1年或2年生枝條形成層細(xì)胞分裂能力強(qiáng)、發(fā)育快、易成活)

  2. 處理插條:枝條的形態(tài)學(xué)上端為平面,下端要削成斜面,這樣在扦插后可增加吸收水分的面積,促進(jìn)成活。

  3. 處理方法:

  1)浸泡法:把插條的基部浸泡在配制好的溶液中,深約3cm,處理幾小時(shí)至一天。(要求的溶液濃度較低,并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地方進(jìn)行處理)

  2)沾蘸法:把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s),深約1.5cm即可。

  實(shí)驗(yàn)十八 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化

  一、實(shí)驗(yàn)原理:

  1.在含糖的液體培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一個(gè)封閉容器內(nèi)的酵母菌種群,通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)可以測(cè)定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時(shí)間而發(fā)生的數(shù)量變化。

  2.養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長(zhǎng)的限制因素。

  二、酵母菌計(jì)數(shù)方法:抽樣檢測(cè)法或顯微計(jì)數(shù)法(用血球計(jì)數(shù)板)。

  先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上,用吸管吸取培養(yǎng)液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行滲入。多余培養(yǎng)液用濾紙吸去。稍待片刻,待細(xì)菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部,將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央,計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量,再以此為根據(jù),估算試管中的酵母菌總數(shù)。

  注意:從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前,要將試管輕輕震蕩幾次。

  實(shí)驗(yàn)十九 土壤中動(dòng)物類群豐富度的研究

  一、實(shí)驗(yàn)原理:

  1.土壤不僅為植物提供水分和礦質(zhì)元素,也是一些動(dòng)物的良好棲息場(chǎng)所。研究土壤中動(dòng)物類群的豐富度,操作簡(jiǎn)便,有助于理解群落的基本特征與結(jié)構(gòu)。

  2.許多土壤動(dòng)物有較強(qiáng)的活動(dòng)能力,而且身體微小,因此不能用樣方法或標(biāo)志重捕法進(jìn)行調(diào)查。在進(jìn)行這類研究時(shí),常用取樣器取樣的方法進(jìn)行采集、調(diào)查,即:用一定規(guī)格的捕捉器(如采集缺罐、吸蟲(chóng)器等進(jìn)行取樣)。

  二、豐富度的統(tǒng)計(jì)方法:記名計(jì)算法和目測(cè)估計(jì)法。

  記名計(jì)算法是指在一定面積的樣地中,直接數(shù)出各種群的個(gè)體數(shù)目,這一般用于個(gè)體較大,種群數(shù)量有限的群落。

  目測(cè)估計(jì)法是按預(yù)先確定的多度等級(jí)來(lái)估計(jì)單位面積上個(gè)體數(shù)量的多少。等級(jí)的劃分和表示方法有:“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。

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