阿莫西林的研究進(jìn)展
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周長(zhǎng)燕1由 分享
【摘要】藥物阿莫西林的原有劑型有片劑、膠囊劑等，目前又出現(xiàn)了一些新的劑型、制劑，為了適應(yīng)新劑型、制劑的要求和進(jìn)一步完善阿莫西林原有的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，筆者對(duì)測(cè)定阿莫西林制劑含量的方法進(jìn)行了研究，并在本文中作了闡述。
【關(guān)鍵詞】阿莫西林 制劑 含量 測(cè)定方法 研究進(jìn)展
作為光譜抗生素藥物的一種，臨床上阿莫西林被廣泛應(yīng)用，其又名為羥氨芐青霉素，屬β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素。作為阿莫西林研究的一個(gè)重要方面，阿莫西林制劑的含量的測(cè)定方法一直備受關(guān)注。筆者對(duì)測(cè)定阿莫西林制劑含量的方法進(jìn)行了研究，并在本文中作了闡述，以供參考。
測(cè)定阿莫西林制劑含量的方法主要有微生物效價(jià)測(cè)定法、碘量法、電位滴定法、旋光法、分光光度法以及流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法等，下面對(duì)以上這幾種方法一一說(shuō)明。
一 微生物效價(jià)測(cè)定法
作為抗生素測(cè)定經(jīng)典方法之一，微生物效價(jià)測(cè)定法同樣適用于阿莫西林制劑含量的測(cè)定，通過(guò)該種方法測(cè)定出的數(shù)據(jù)能夠直接反應(yīng)阿莫西林對(duì)病菌微生物的抑殺能力，但該種方法的不足之處是實(shí)驗(yàn)操作繁瑣、工作量較大。具體方法是以藤黃八疊球菌(28001)為試驗(yàn)菌種，試驗(yàn)培養(yǎng)基為藥典Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，最低檢測(cè)濃度為0.05mg/L，日內(nèi)和日間變異系數(shù)小于15%，線性范圍為0.05～400mg/L(r=0.997 7，P<0.01)，符合生物樣品分析要求。
二 碘量法
碘量法是利用阿莫西林分子不消耗碘，而其降解產(chǎn)物消耗碘的特性來(lái)測(cè)定阿莫西林含量的方法，也是一種測(cè)定青霉素類抗生素較為通用的方法。具體方法是先將阿莫西林制劑水解成阿莫西林噻唑酸，然后用足夠的、定量的碘與其發(fā)生反應(yīng)，之后再用準(zhǔn)硫代硫酸鈉滴定剩余的碘，從而測(cè)出消耗碘的阿莫西林的量，最終測(cè)出制劑中阿莫西林的含量。
三 電位滴定法
電位滴定法是利用阿莫西林的降解產(chǎn)物能夠與汞鹽(Hg2+)發(fā)生反應(yīng)，形成巰基化物汞鹽這一特性而得以測(cè)定制劑中阿莫西林含量的，青霉素類化合物的降價(jià)降解產(chǎn)物普遍存在這一特性。該種方法先將阿莫西林制劑水解，然后以鉑電極為指示電極、Hg-Hg2SO4為參比電極，然后用硝酸汞滴定液(0.02 mol/L)滴定，最終測(cè)得制劑中阿莫西林的含量。
四 旋光法
旋光法測(cè)定制劑中阿莫西林含量操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)段，該種方法主要是利用了阿莫西林具有旋光性這一特點(diǎn)，需要注意的是在繪制工作曲線過(guò)程中要將檢測(cè)溫度嚴(yán)格控制在(20℃±0.5)℃，阿莫西林濃度在0.5～1.5mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，平均回收率為99.56%，RSD為1.2%。
五 分光光度法
分光光度法主要有比色法、紅外分光光度法、原子吸收分光光度法、熒光分光光度法等方法。
1、比色法
測(cè)定阿莫西林制劑中阿莫西林含量的比色法是基于其能夠與有機(jī)溶劑發(fā)生反應(yīng)形成有色物質(zhì)而進(jìn)行的，該種實(shí)驗(yàn)方法要求反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間以及反應(yīng)(pH)介質(zhì)必須固定，因該種方法影響因素較多且操作步驟復(fù)雜，一般較少采用。
2、紅外分光光度法
紅外分光光度法技術(shù)主要適用于測(cè)定阿莫西林膠囊中阿莫西林含量，它是利用漫反射紅外光譜分析技術(shù)對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行非破壞性、非污染性含量測(cè)定。該種方法具有操作簡(jiǎn)單且檢測(cè)速度快的優(yōu)點(diǎn)，不足之處是誤差相對(duì)較大。具體測(cè)定方法是以KBr作為稀釋劑，準(zhǔn)確稱量并配制標(biāo)準(zhǔn)樣品系列，然后用18.4倍的KBr對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，混勻，研細(xì)，用固定的樣品槽均勻裝樣，壓片，測(cè)定各種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的紅外光譜。選擇輔料淀粉無(wú)干擾的1672.18cm-1為分析峰，840.62cm-1為參考峰，之后應(yīng)用軟件進(jìn)行定量分析處理，平均回收率為99.6%。
3、原子吸收分光光度法
原子吸收分光光度法利用高錳酸鉀在堿性介質(zhì)中能夠與阿莫西林含硫化合物的發(fā)生反應(yīng)這一特性，在這個(gè)反應(yīng)中高錳酸鉀被還原為錳酸根，并與氯化鋇中的鋇離子結(jié)合成藍(lán)色錳酸鋇沉淀，之后再經(jīng)流動(dòng)注射在線過(guò)濾稀釋，以AAS法測(cè)定濾液中反應(yīng)剩余錳的量，從而間接得出被測(cè)制劑中阿莫西林的含量。該種方法經(jīng)化學(xué)參數(shù)及流動(dòng)注射參數(shù)優(yōu)化，同藥典法比起來(lái)，數(shù)據(jù)更為準(zhǔn)確。
4、熒光分光光度法
之所以可以用熒光分光光度法測(cè)定制劑中阿莫西林的含量，是因?yàn)槠渚哂休^好的熒光性質(zhì)，尤其是在激發(fā)波長(zhǎng)(λex)277nm與發(fā)射波長(zhǎng)(λem)303nm處，阿莫西林的熒光值最大。阿莫西林分子中既含有酸性基團(tuán)又含有堿性基團(tuán)，這就使得熒光光譜對(duì)于溶液的酸度相當(dāng)敏感。有關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，阿莫西林在微堿性溶液中的熒光發(fā)射最強(qiáng)，隨著溫度的升高，其熒光輕度會(huì)下降，且與Ca2+、Mg2+等無(wú)機(jī)離子有配合作用。如果在溶液中加入丙酮，阿莫西林的熒光強(qiáng)度會(huì)降低，甚至猝滅；如果向溶液中加入乙醇或甲醇溶液，其熒光強(qiáng)度會(huì)增加。除此之外，CTAB（表面活性劑）對(duì)其還有增效的作用。因?yàn)樵摲N方法的選擇性和靈敏度都相對(duì)較高，因此被廣泛用于藥物的前期分析。
六 流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法
流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法的具體操作是先將阿莫西林樣品注入水的載體流，再將其與鹽酸中的二價(jià)鈀試劑流混合，當(dāng)溫度達(dá)到40℃時(shí)，阿莫西林會(huì)與二價(jià)鈀形成黃色的混合物，這種黃色混合物在波長(zhǎng)400nm處時(shí)吸收最大，其吸收度會(huì)隨著濃度的增大而增強(qiáng)。在硫酸溶液中，阿莫西林會(huì)生成含巰基的降解產(chǎn)物，在羅丹明6G的增敏作用下，含巰基的化合物（阿莫西林的降解產(chǎn)物）能夠和Ce(Ⅳ)發(fā)生發(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)較強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光。該中測(cè)定阿莫西林含量方法的優(yōu)點(diǎn)是靈敏度較高，且線性范圍寬，能夠有效排除樣品劑型對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾。
七 結(jié)語(yǔ)
從上文中我們可以看出，測(cè)定制劑阿莫西林含量的方法有很多，除了以上這六種外，還有高效液相色譜法等其它方法。我們從這些方法中不難看出，分析技術(shù)趨向微量、靈敏、簡(jiǎn)便、專屬、快速和自動(dòng)化是今后測(cè)定制劑阿莫西林含量方法的發(fā)展方向。阿莫西林含量的測(cè)定能夠有效指導(dǎo)醫(yī)護(hù)人員對(duì)于該藥的用量及用法，是阿莫西林研究的一個(gè)重要方面。希望以上方法能為醫(yī)護(hù)人員提供參考。
參 考 文 獻(xiàn)
[1]羅興洪，周進(jìn)東，趙耀軍.高效液相色譜法測(cè)定阿莫西林顆粒中高分子雜質(zhì)[J].中國(guó)藥業(yè)，2004，13(5):32-3.
[2]劉媛，丁嵐，謝孟峽.動(dòng)物組織中阿莫西林殘留的液相色譜分析方法研究[J].色譜，2007，21(6):541-544.
[3]沈錚，張亮，馮艷.HPLC-MS同時(shí)測(cè)定人血漿中阿莫西林和克拉維酸的濃度[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，33(1): 24-27.
【關(guān)鍵詞】阿莫西林 制劑 含量 測(cè)定方法 研究進(jìn)展
作為光譜抗生素藥物的一種，臨床上阿莫西林被廣泛應(yīng)用，其又名為羥氨芐青霉素，屬β-內(nèi)酰胺青霉素類抗生素。作為阿莫西林研究的一個(gè)重要方面，阿莫西林制劑的含量的測(cè)定方法一直備受關(guān)注。筆者對(duì)測(cè)定阿莫西林制劑含量的方法進(jìn)行了研究，并在本文中作了闡述，以供參考。
測(cè)定阿莫西林制劑含量的方法主要有微生物效價(jià)測(cè)定法、碘量法、電位滴定法、旋光法、分光光度法以及流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法等，下面對(duì)以上這幾種方法一一說(shuō)明。
一 微生物效價(jià)測(cè)定法
作為抗生素測(cè)定經(jīng)典方法之一，微生物效價(jià)測(cè)定法同樣適用于阿莫西林制劑含量的測(cè)定，通過(guò)該種方法測(cè)定出的數(shù)據(jù)能夠直接反應(yīng)阿莫西林對(duì)病菌微生物的抑殺能力，但該種方法的不足之處是實(shí)驗(yàn)操作繁瑣、工作量較大。具體方法是以藤黃八疊球菌(28001)為試驗(yàn)菌種，試驗(yàn)培養(yǎng)基為藥典Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，最低檢測(cè)濃度為0.05mg/L，日內(nèi)和日間變異系數(shù)小于15%，線性范圍為0.05～400mg/L(r=0.997 7，P<0.01)，符合生物樣品分析要求。
二 碘量法
碘量法是利用阿莫西林分子不消耗碘，而其降解產(chǎn)物消耗碘的特性來(lái)測(cè)定阿莫西林含量的方法，也是一種測(cè)定青霉素類抗生素較為通用的方法。具體方法是先將阿莫西林制劑水解成阿莫西林噻唑酸，然后用足夠的、定量的碘與其發(fā)生反應(yīng)，之后再用準(zhǔn)硫代硫酸鈉滴定剩余的碘，從而測(cè)出消耗碘的阿莫西林的量，最終測(cè)出制劑中阿莫西林的含量。
三 電位滴定法
電位滴定法是利用阿莫西林的降解產(chǎn)物能夠與汞鹽(Hg2+)發(fā)生反應(yīng)，形成巰基化物汞鹽這一特性而得以測(cè)定制劑中阿莫西林含量的，青霉素類化合物的降價(jià)降解產(chǎn)物普遍存在這一特性。該種方法先將阿莫西林制劑水解，然后以鉑電極為指示電極、Hg-Hg2SO4為參比電極，然后用硝酸汞滴定液(0.02 mol/L)滴定，最終測(cè)得制劑中阿莫西林的含量。
四 旋光法
旋光法測(cè)定制劑中阿莫西林含量操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)段，該種方法主要是利用了阿莫西林具有旋光性這一特點(diǎn)，需要注意的是在繪制工作曲線過(guò)程中要將檢測(cè)溫度嚴(yán)格控制在(20℃±0.5)℃，阿莫西林濃度在0.5～1.5mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，平均回收率為99.56%，RSD為1.2%。
五 分光光度法
分光光度法主要有比色法、紅外分光光度法、原子吸收分光光度法、熒光分光光度法等方法。
1、比色法
測(cè)定阿莫西林制劑中阿莫西林含量的比色法是基于其能夠與有機(jī)溶劑發(fā)生反應(yīng)形成有色物質(zhì)而進(jìn)行的，該種實(shí)驗(yàn)方法要求反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間以及反應(yīng)(pH)介質(zhì)必須固定，因該種方法影響因素較多且操作步驟復(fù)雜，一般較少采用。
2、紅外分光光度法
紅外分光光度法技術(shù)主要適用于測(cè)定阿莫西林膠囊中阿莫西林含量，它是利用漫反射紅外光譜分析技術(shù)對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行非破壞性、非污染性含量測(cè)定。該種方法具有操作簡(jiǎn)單且檢測(cè)速度快的優(yōu)點(diǎn)，不足之處是誤差相對(duì)較大。具體測(cè)定方法是以KBr作為稀釋劑，準(zhǔn)確稱量并配制標(biāo)準(zhǔn)樣品系列，然后用18.4倍的KBr對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，混勻，研細(xì)，用固定的樣品槽均勻裝樣，壓片，測(cè)定各種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的紅外光譜。選擇輔料淀粉無(wú)干擾的1672.18cm-1為分析峰，840.62cm-1為參考峰，之后應(yīng)用軟件進(jìn)行定量分析處理，平均回收率為99.6%。
3、原子吸收分光光度法
原子吸收分光光度法利用高錳酸鉀在堿性介質(zhì)中能夠與阿莫西林含硫化合物的發(fā)生反應(yīng)這一特性，在這個(gè)反應(yīng)中高錳酸鉀被還原為錳酸根，并與氯化鋇中的鋇離子結(jié)合成藍(lán)色錳酸鋇沉淀，之后再經(jīng)流動(dòng)注射在線過(guò)濾稀釋，以AAS法測(cè)定濾液中反應(yīng)剩余錳的量，從而間接得出被測(cè)制劑中阿莫西林的含量。該種方法經(jīng)化學(xué)參數(shù)及流動(dòng)注射參數(shù)優(yōu)化，同藥典法比起來(lái)，數(shù)據(jù)更為準(zhǔn)確。
4、熒光分光光度法
之所以可以用熒光分光光度法測(cè)定制劑中阿莫西林的含量，是因?yàn)槠渚哂休^好的熒光性質(zhì)，尤其是在激發(fā)波長(zhǎng)(λex)277nm與發(fā)射波長(zhǎng)(λem)303nm處，阿莫西林的熒光值最大。阿莫西林分子中既含有酸性基團(tuán)又含有堿性基團(tuán)，這就使得熒光光譜對(duì)于溶液的酸度相當(dāng)敏感。有關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，阿莫西林在微堿性溶液中的熒光發(fā)射最強(qiáng)，隨著溫度的升高，其熒光輕度會(huì)下降，且與Ca2+、Mg2+等無(wú)機(jī)離子有配合作用。如果在溶液中加入丙酮，阿莫西林的熒光強(qiáng)度會(huì)降低，甚至猝滅；如果向溶液中加入乙醇或甲醇溶液，其熒光強(qiáng)度會(huì)增加。除此之外，CTAB（表面活性劑）對(duì)其還有增效的作用。因?yàn)樵摲N方法的選擇性和靈敏度都相對(duì)較高，因此被廣泛用于藥物的前期分析。
六 流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法
流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法的具體操作是先將阿莫西林樣品注入水的載體流，再將其與鹽酸中的二價(jià)鈀試劑流混合，當(dāng)溫度達(dá)到40℃時(shí)，阿莫西林會(huì)與二價(jià)鈀形成黃色的混合物，這種黃色混合物在波長(zhǎng)400nm處時(shí)吸收最大，其吸收度會(huì)隨著濃度的增大而增強(qiáng)。在硫酸溶液中，阿莫西林會(huì)生成含巰基的降解產(chǎn)物，在羅丹明6G的增敏作用下，含巰基的化合物（阿莫西林的降解產(chǎn)物）能夠和Ce(Ⅳ)發(fā)生發(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)較強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光。該中測(cè)定阿莫西林含量方法的優(yōu)點(diǎn)是靈敏度較高，且線性范圍寬，能夠有效排除樣品劑型對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾。
七 結(jié)語(yǔ)
從上文中我們可以看出，測(cè)定制劑阿莫西林含量的方法有很多，除了以上這六種外，還有高效液相色譜法等其它方法。我們從這些方法中不難看出，分析技術(shù)趨向微量、靈敏、簡(jiǎn)便、專屬、快速和自動(dòng)化是今后測(cè)定制劑阿莫西林含量方法的發(fā)展方向。阿莫西林含量的測(cè)定能夠有效指導(dǎo)醫(yī)護(hù)人員對(duì)于該藥的用量及用法，是阿莫西林研究的一個(gè)重要方面。希望以上方法能為醫(yī)護(hù)人員提供參考。
參 考 文 獻(xiàn)
[1]羅興洪，周進(jìn)東，趙耀軍.高效液相色譜法測(cè)定阿莫西林顆粒中高分子雜質(zhì)[J].中國(guó)藥業(yè)，2004，13(5):32-3.
[2]劉媛，丁嵐，謝孟峽.動(dòng)物組織中阿莫西林殘留的液相色譜分析方法研究[J].色譜，2007，21(6):541-544.
[3]沈錚，張亮，馮艷.HPLC-MS同時(shí)測(cè)定人血漿中阿莫西林和克拉維酸的濃度[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，33(1): 24-27.